没有彻底落实。英国学者贝利指出，《令》颁布后，10余名传教士依然滞留在长崎并担任葡萄牙商船长崎贸易的向导，130余名耶稣会士仍在九州布教，教徒数量仍在迅勐增加，而以西班牙方济各修道会为代表的其他势力也开始进入日本。
但是，秀吉的动机，深深的影响了德川家康。德川家康统一日本后，对秀吉宗教和贸易分离的政策，深以为然。
他禁止天主教，为的是防止关西信教诸侯，勾结海外势力作乱，也为了限制他们通过外贸壮大自己的实力。
从这时候开始，幕府对教徒的迫害逐步开始加剧。庆长2年，秀吉下令把日本信徒及方济各会修道士总计26人在长崎钉死在十字架上，次年，丰臣秀吉病死在伏见城。
庆长18年，在家康已经明令禁止家臣信教的情况下，大名有马晴信的宗教信仰败露，旋即被剥领流放。
随即被迫让家臣杀死。庆长19年1月，退居幕后的德川家康授意二代将军德川秀忠，组织起草了新的《伴天连追放令》，即
“庆长禁教令”。宣布驱逐日本所有传教士，其中包括89名耶稣会士、4名方济各会修道士、2名多明我会修道士、2名奥古斯丁会修道士。
德川家康病死后，二代将军秀忠的禁教措施愈发激进，开始不断创造借口，处死教徒。
“京都大殉教”、
“元和大殉教”相继发生。元和9年三代将军德川家光上台后，再次炮制了
“江户大殉教”、
“平户大殉教”与
“东北大殉教”等惨桉。更是出现了
“云仙地狱”与
“踏绘”等诸多针对信徒的措施。学者井上清统计，1614—1635年，被迫害死亡的信徒高达28万人之众。
吉利支丹信徒们，面对屠杀忍无可忍。终于在1637年发动了岛原之乱。
岛原之乱由于实力对比悬殊，被残酷镇压下去，随即，全日本开始了屠灭信徒的运动。
1644年，也就是明朝灭亡的那一年，日本最后一位耶稣会士殉教，
“无神甫时代”开始，日本的
“吉利支丹时代”彻底终结。而杨凡早在1627年，接见桃子夫人时，就意识到，十年后的这场大动乱，是查收东瀛最好的机会，也就是从那时
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